利用流式细胞术鉴定桦木染色体倍性和DNA含量

作者:黄茂根; 沈凝; 刘雪羽; 吴兴盛; 陈爱平; 孟岩; 胡现铬; 童再康; 黄华宏; 楼雄珍
来源:西南林业大学学报, 2022, 1-9.

摘要

基于流式细胞术(FCM)研究体系,构建能快速、准确鉴定桦木属植物倍性和测定DNA含量的研究体系,是测定不同桦木属植物倍性与基因组大小的有效方法。使用流式细胞术检测7种桦树属类物种,以物种不同生长状态(嫩叶,幼叶,成熟叶)为实验材料,不同存储方式(常温、冷藏和聚乙烯吡咯烷酮保存PVP)进行实验处理,对9种常用的裂解液进行筛选与优化。结果表明:桦木属植物DNA含量测定中,新鲜幼叶以1%PVP浸泡常温保存,并使用MgSO4裂解液制备细胞核悬浮液上机效果最佳;桦木属植物中,基因组倍性依次为黑桦(2.09±0.04 Gb,8倍体)>坚桦(1.53±0.08 Gb,6倍体)>光皮桦(0.87±0.05 Gb,4倍体)=岳桦(0.80±0.07 Gb,4倍体)>垂枝桦(0.46±0.03 Gb,2倍体)=河桦(0.51±0.01 Gb,2倍体)。因此,桦木属植物DNA倍性和DNA含量可以通过FCM研究体系进行测定,且3倍体(0.66±0.02Gb)子代的鉴定结果表明光皮桦与河桦之间不存在生殖隔离。