摘要

目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对血管平滑肌细胞Cav3.1表达的影响及其作用机制。方法酶消化法原代培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞,应用第5代传代细胞,实验随机分为7组:对照组(不加任何药物)、AngⅡ组[加入AngⅡ(0.1μmol/L)培养24 h]、AngⅡ+氯沙坦钾组[加入氯沙坦钾(1μmol/L)培养1 h,再加入AngⅡ(0.1μmol/L)共同培养24 h]、AngⅡ+PD98059组[加入PD98059(10μmol/L)预刺激1 h,再加入AngⅡ(0.1μmol/L)共同培养24 h]、PD98059组[加入PD98059(10μmol/L)培养1 h]、AngⅡ+氯沙坦钾+PD98059组[先加入氯沙坦钾(1μmol/L),PD98059(10μmol/L)培养1 h,再加入AngⅡ(0.1μmol/L)共同培养24 h]、氯沙坦钾组[加入氯沙坦钾(1μmol/L)培养4 h]。RT-PCR、Western blot方法测定各组T型钙通道的表达。结果PCR结果显示:与对照组(1.000±0.315)比较,AngⅡ组Cav3.1表达量(17.930±0.954)明显增加(P<0.01);PD98059组、氯沙坦钾组Cav3.1表达量为0.928±0.262、0.978±0.292,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);AngⅡ+氯沙坦钾组、AngⅡ+PD98059组、AngⅡ+氯沙坦钾+PD98059组的Cav3.1表达量分别为0.125±0.007、0.066±0.015、0.109±0.018,明显低于AngⅡ组(P<0.01)。Western blot结果显示:与对照组比较,AngⅡ+氯沙坦钾组、AngⅡ+PD98059组及AngⅡ+氯沙坦钾+PD98059组Cav3.1蛋白表达明显降低(P<0.05);而PD98059组及氯沙坦钾组Cav3.1蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 AngⅡ通过Ras/PKCζ/MEK/ERK1/2路径增加血管平滑肌细胞Cav3.1的表达。

  • 单位
    中国医科大学附属盛京医院

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