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摘要
目的:采用气相色谱-质谱法(gaschrom atography-massspectrom etry,GC-MS)结合化学计量学分析测定大鼠肾组织中小分子代谢物。方法:色谱柱为HP-5MS石英毛细管柱(30m×0.25 m×0.25mm),初始柱温为100℃,保持3min,程序升温为8℃/min至300℃,保持6min。肾脏组织绞碎后加甲醇萃取,十七酸为内标,离心分离得上清液,氮气吹干,再用甲氧胺吡啶肟化、衍生化试剂衍生后进行GC-MS分析,对重叠色谱峰采用化学计量学分辨,得各化合物的纯色谱与光谱曲线,通过质谱库检索定性化合物,同时结合标准品并参考文献确定化合物结构,用内标法对各成分进行半定量。结果:共鉴定出53种成分,肾组织中主要代谢物成分为尿素、氨基酸、糖类与脂肪酸。结论:GC-MS辅以化学计量学法相比单用GC-MS分析,结果更准确可靠,将为采用代谢组学技术研究肾脏病变分子标记物提供基础。
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