右美托咪定对高迁移率族蛋白1诱导人脐静脉内皮细胞炎性反应的影响

作者：张志发; 朱梦娇; 杨少兵; 陶怡芝; 王学仁^*

来源：华中科技大学学报(医学版), 2022, 51(01): 38-43.

DOI：10.3870/j.issn.1672-0741.2022.01.007

• 右美托咪定
• 脂多糖
• 人脐静脉内皮细胞
• 高迁移率族蛋白1

目的 研究右美托咪定对脂多糖(LPS)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分泌高迁移率族蛋白1(HMGB1)的影响，及其调控HMGB1诱导HUVECs炎性反应的分子机制。方法 100 ng/mL的LPS刺激HUVECs 16 h后，用不同浓度的右美托咪定(0.01、0.1、1、10 nmol/L)分别处理细胞4 h,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞上清液中HMGB1的含量。MTT检测不同浓度右美托咪定对HUVECs细胞活力的影响，细胞免疫荧光检测HMGB1的表达及分布。将HUVECs随机分为对照组、右美托咪定组、HMGB1组、右美托咪定+HMGB1组，右美托咪定和HMGB1的浓度分别是1 nmol/L、1μg/mL。ELISA检测细胞上清液中TNF-α和IL-1β含量，Western blotting检测MAPK信号通路的磷酸化水平，再采用ERK1/2、p38 MAPK通路抑制剂进行阻断实验。结果 不同浓度的右美托咪定对HUVECs活力无影响。LPS作用后，HUVECs上清液中HMGB1的含量增加(P<0.01),而右美托咪定可呈剂量依赖性地抑制HMGB1的表达(P<0.05);LPS刺激HMGB1蛋白从细胞核转移至胞质，而右美托咪定可显著抑制LPS引起的HMGB1移位(P<0.05)。相对于对照组，HMGB1组上清液中炎症因子TNF-α和IL-1β含量增加(均P<0.01),外源性HMGB1促进ERK1/2、p38 MAPK和JNK磷酸化(均P<0.05),而右美托咪定+HMGB1组可抑制上述炎症因子的分泌并部分逆转ERK1/2、p38 MAPK的磷酸化(均P<0.05)。p38 MAPK抑制剂(SB203580)可下调HMGB1组IL-1β的表达，ERK1/2阻滞剂(PD98059)可下调TNF-α和IL-1β的表达，且与右美托咪定具有协同抑制TNF-α和IL-1β表达的作用(均P<0.05)。结论 右美托咪定可抑制LPS引起的HMGB1分泌，并通过抑制HMGB1相关的MAPK信号通路发挥抗炎效应。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院