突变型pAAV-CD151真核表达载体的构建与鉴定

作者：林敬阳; 秦瑾; 刘正湘; 刘毓; 程忠良; 左后娟; 汪道文

来源：华中科技大学学报(医学版), 2009, 38(06): 789-792.

DOI：10.3870/j.issn.1672-0741.2009.06.017

• CD151
• 基因定点突变
• 重组腺相关病毒

目的构建CD151两种突变体,为研究CD151的功能及CD151-整合素复合体的功能奠定基础。方法以pAAV-CD151质粒为模板,采用定点突变技术,构建整合素α3β1/α6β1结合缺陷QRD突变体(pAAV-CD151-QRD-AAA194-196突变体)和CD151囊泡运输基序缺陷的ARSA突变体(pAAV-CD151-YRSL-ARSA245-248突变体),并包装两种突变体的重组腺相关病毒。结果经过测序鉴定成功构建了CD151的QRD和ARSA突变体,亦成功包装了重组腺相关病毒,病毒滴度符合本实验要求。结论成功构建CD151两种突变体并包装成重组腺相关病毒,为进一步研究CD151的功能和作用机制奠定了基础。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院