摘要
目的观察骨桥蛋白(OPN)在慢性胰腺炎(CP)大鼠胰腺组织中的表达,探讨其与胰腺纤维化的关系。方法20只雄性Wistar大鼠按数字表法随机分为对照组和CP模型组,对照组尾静脉注射无水乙醇及甘油,CP组采用单次尾静脉注射二氯二丁基锡(DBTC)构建CP模型。术后6周处死大鼠取胰腺组织,常规行病理学检查,采用Sirius-Red染色评估胰腺纤维化程度,免疫组织化学法及蛋白质印迹法检测大鼠胰腺组织OPN、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)的表达,分析OPN表达与纤维化程度的关系。结果 CP组死亡3只大鼠,成活的7只大鼠胰腺组织镜下见胰腺小叶间大量纤维组织增生,腺泡细胞空泡样变性坏死,小叶间大量炎症细胞浸润,胰管扩张。Sirius-Red染色显示CP组胰腺小叶间隙内大量鲜红色条索状及网状胶原纤维沉积,而对照组仅在血管及胰管周围有少许纤维沉积,CP组染色面积为(51±11)%,显著高于对照组的(9±4)%,差异有统计学意义(P<0.01)。免疫组织化学染色显示,CP组7只大鼠中3只胰腺组织OPN强阳性表达,4只阳性表达;对照组10只大鼠中3只胰腺组织OPN弱阳性表达,7只阴性表达,CP组OPN的表达明显高于对照组,差异有统计学意义(Z=-5.170,P<0.01),且其表达与Sirius-Red染色面积呈正相关(r=0.790,P><0.01)。蛋白质印迹法结果显示,CP组OPN、α-SMA及ColⅠ表达量显著高于对照组(0.70±0.22比0.24±0.11,0.71±0.10比0.06±0.01,2.83±1.42比0.39±0.07),差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论尾静脉单次注射DBTC可成功构建CP大鼠模型,CP大鼠胰腺组织OPN表达明显增加,且与胰腺纤维化程度呈正相关。
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单位中国人民解放军第二军医大学; 长海医院消化内科