摘要
目的 研究糖蛋白M6B(glycoprotein M6B,GPM6B)对巨噬细胞炎症因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ和IL-6的影响。方法 (1)Western blot和qPCR检测RAW264.7经典激活的巨噬细胞(classically activated macrophage,M1)和替代激活的巨噬细胞(alternatively activated macrophage, M2)中GPM6B表达量变化。(2)分别用对照组(shScramble)和GPM6B干涉组(sh-GPM6B1和sh-GPM6B2)的慢病毒感染RAW264.7巨噬细胞系,荧光显微镜下观察病毒的感染效率。Western blot和qPCR检测GPM6B的干涉效率。(3)qPCR检测对照组和GPM6B干涉组促炎因子IL-1β、TNF-α和IFN-γ的mRNA表达水平,ELISA法检测上清中IL-1β和IL-6的含量。(4)Western blot检测干涉GPM6B后炎症相关分子p65和Iκα的磷酸化水平变化。结果 (1)相比于对照组,RAW264.7巨噬细胞M1型中GPM6B蛋白和mRNA水平均显著升高(P<0.05),而M2型中GPM6B蛋白和mRNA水平均显著降低(P<0.05)。(2)与sh-Scramble组相比,sh-GPM6B1组和sh-GPM6B2组GPM6B蛋白和m RNA水平均显著降低(P<0.05)。(3)干涉GPM6B后促炎因子IL-1β、TNF-α和IFN-γ的m RNA表达水平和上清中IL-1β和IL-6均显著降低(P<0.05)。(4)干涉GPM6B后炎症相关分子p65和Iκα的磷酸化水平降低。结论 干涉GPM6B可抑制RAW264.7巨噬细胞促炎因子的表达。
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单位西京医院; 中国人民解放军空军军医大学