穿心莲内酯在镉致IEC6细胞线粒体自噬中的作用

作者:王涛; 蔡瑶; 曹彬彬; 袁燕; 张泉; 刘宗平*
来源:中国兽医科学, 2022, 52(04): 524-530.
DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0027

摘要

为探讨穿心莲内酯(Ad)在镉诱导肠上皮细胞线粒体自噬中的作用,体外培养IEC6细胞,以5μmol/L镉处理不同时间(0、6、12 h),利用荧光显微镜观察细胞中外源性GFP-RFP-LC3聚点的变化。用7μmol/L Ad预处理IEC6细胞16 h后,5μmol/L镉处理细胞12 h,利用Western-blot方法检测线粒体自噬相关蛋白p62、LC3、PINK1、Parkin的表达水平;利用荧光显微镜观察GFP-RFP-LC3和Bcl-XL在细胞中分布的变化。结果,5μmol/L镉处理IEC6细胞不同时间后,红色LC3聚点数量增多,与6 h组相比,镉处理细胞12 h后,LC3红色聚点数量下降;Western-blot结果显示,与镉单独处理组相比,Ad与镉共处理组Parkin蛋白表达水平升高,p62、LC3-II、PINK1表达水平降低;荧光观察结果显示,与镉单独处理组相比,Ad与镉共处理组LC3、Bcl-XL红色信号增强,绿色信号减弱。上述结果表明,镉能够引起IEC6细胞自噬流阻滞,Ad可以通过缓解镉诱导的自噬流阻滞,促进镉致IEC6细胞线粒体自噬的发生。

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