猪流行性乙型脑炎病毒prM-E抗原捕获ELISA检测方法的建立

作者：王晓磊; 霍红; 郭立平; 李伟; 步志高; 华荣虹

来源：中国预防兽医学报, 2015, 37(06): 465-485.

• 流行性乙型脑炎病毒
• pr M-E
• 抗原捕获ELISA
• 检测

为建立猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)的检测方法,本研究以pr M-E结构蛋白特异性单克隆抗体(MAb)5B10和5E7分别作为捕获抗体和辣根过氧化酶标记的检测抗体,对反应条件进行优化,建立了抗原捕获ELISA(AC-ELISA)方法。该方法与其它常见猪病病原无交叉反应,特异性强。该方法可以检出1.25×105 pfu/m L的病毒和48.44 ng/m L pr M-E重组蛋白,最佳线性检测范围为0.05μg/m L1.00μg/m L,线性相关系数(R2)为0.996。组装的试剂盒批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,具有良好的重复性。试剂盒4℃保存12个月稳定。该研究为JEV亚单位疫苗的研制与生产提供了技术支持。

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 农业部; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所