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摘要
以碱提酸沉法制备的绿豆蛋白为研究对象,采用Box-Behnken响应面分析法优化绿豆蛋白水解物的制备工艺。在单因素实验的基础上,选取水解时间、底物浓度、加酶量、水解温度为影响因素,以对脱氧胆酸钠的结合能力为考察指标,采用响应面分析法得到绿豆蛋白水解物的最优制备工艺。对最优条件下制备的绿豆蛋白水解物进行超滤,随后采用Sephacryl S-100 High Resolution凝胶层析柱进行纯化得到降血脂作用较好的水解物。结果表明:在水解时间为146 min,底物浓度为3.1 g/100 mL,加酶量为9861 U/g,水解温度为52.1℃条件下得到的水解物与脱氧胆酸钠结合效果最好,结合率为60.46%,与模型预测值61.86%接近,误差较小。在上述最优条件下制备的绿豆蛋白降血脂水解物经超滤后,水解物的截留液呈现出更好的活性。
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