spautin-1对雨蛙素诱导的急性胰腺炎AR42J细胞凋亡及自噬的影响

作者：张雪良; 徐子琴; 熊建华^*

来源：中华胰腺病杂志, 2018, 18(04).

• 胰腺炎
• spautin-1
• 自噬
• 细胞凋亡

目的观察自噬抑制剂spautin-1干预雨蛙素诱导的急性胰腺炎(AP)AR42J细胞后对腺泡细胞自噬、凋亡率及坏死率的影响,探讨其在AP发病中的作用。方法分别给予AR42J细胞生理盐水(对照组)、100 nmol/L的雨蛙素(雨蛙素组)、100 nmol/L的雨蛙素联合10μmol/L spautin-1(雨蛙素+spautin-1组)处理24 h,雨蛙素作用AR42J细胞0、6、12、24 h,采用蛋白质印迹法检测细胞自噬相关的LC3、p62、Beclin1蛋白表达,BGAM法检测细胞胰蛋白酶活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率,乳酸脱氢酶细胞毒性测定细胞坏死率。结果0、6、12、24 h雨蛙素组LC3Ⅰ表达量分别为4.32±0.46、4.68±0.41、5.22±0.38、5.88±0.63,LC3Ⅱ表达量为0.36±0.02、0.64±0.05、0.93±0.08、2.43±0.23,p62表达量为0.24±0.01、0.22±0.02、0.84±0.09、1.25±0.13,随时间延长,表达量均逐渐增加,差异均有统计学意义(P值均<0.05),而各时间点Beclin1表达差异无统计学意义。与雨蛙素组比较,雨蛙素+spautin-1组LC3Ⅰ(0.24±0.01比0.65±0.06)、LC3Ⅱ(0.71±0.08比1.26±0.15)和p62(0.56±0.06比1.06±0.09)表达量均显著降低,同时细胞胰蛋白酶活性降低(1.13±0.4比1.65±0.18),细胞凋亡率增加[(23.64±2.12)%比(6.58±4.01)%],细胞坏死率下降[(7.64±2.12)%比(27.58±3.46)%],差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论spautin-1可通过阻止雨蛙素诱导的AP AR42J细胞自噬障碍,抑制胰蛋白酶激活,进而促进细胞凋亡,抑制细胞坏死。