细粒棘球蚴FABP基因的原核表达及蛋白鉴定

作者:郝慧芳; 王志钢; 高连山; 赵云龙; 白健; 金永; 周华从; 李洁; 陈献威
来源:生物技术通报, 2010, (07): 92-95.
DOI:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2010.07.004

摘要

构建原核表达载体pET-FABP,优化表达条件,采用免疫学方法鉴定纯化的FABP融合蛋白。载体pMD19-T-FABP和pET-44a( )经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,将回收的FABP片段与pET-44a( )连接,构建原核表达载体pET-FABP并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,优化表达条件,纯化FABP融合蛋白,Western blotting鉴定。成功构建了原核表达载体pET-FABP并在大肠杆菌中高效表达。纯化后的蛋白经SDS-PAGE和Western blotting鉴定正确。构建的表达载体pET-FABP可以在大肠杆菌中大量表达Nus-FABP融合蛋白,为进一步研制FABP...

全文