登革2型病毒非结构蛋白NS4B及其突变体的真核表达与鉴定

作者：赵慧; 刘忠钰; 秦成峰; 秦鄂德

来源：生物技术通讯, 2008, 19(04): 506-508.

DOI：10.3969/j.issn.1009-0002.2008.04.008

• 登革病毒
• 非结构蛋白NS4B
• 真核表达 dengue virus
• nonstructural protein 4B
• enkaryotic expression

目的:构建登革2型病毒非结构蛋白NS4B及其突变体Δ2K-NS4B基因的真核载体,并观察二者在哺乳动物细胞内的定位情况。方法:从登革2型病毒43株的全长cDNA克隆载体上扩增获得编码NS4B及缺失2K片段的NS4B突变体Δ2K-NS4B的基因;通过基因重组的方法分别将2段基因克隆入真核表达载体pcDNA6/V5-HisA,获得重组真核表达载体pc/D2-NS4B和pc/D2-Δ2K-NS4B;经脂质体法转染BHK-21细胞后,用RT-PCR、间接免疫荧光和Western印迹鉴定表达的蛋白。结果:重组蛋白D2-NS4B和D2-Δ2K-NS4B可在BHK-21细胞中表达,二者均定位于细胞质中,并具...

• 单位
  病原微生物生物安全国家重点实验室; 军事医学科学院