科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
为探究J亚群禽白血病病毒（Subgroup J of avian leukosis virus,ALV-J）对鸡脾脏巨噬细胞天然免疫反应的影响，试验利用密度梯度离心法和贴壁法，从鸡脾脏组织中分离得到单核细胞，并通过显微镜观察培养至24 h、72 h、120 h单核细胞的分化过程；通过PCR扩增ALV-J特异性引物H5/H7，验证脾脏巨噬细胞对ALV-J的易感情况；同时，通过qPCR验证感染ALV-J后鸡原代脾脏巨噬细胞中炎性因子、干扰素及肿瘤抑制因子的表达。结果显示：单核细胞分化至第120 h形成形态正常的巨噬细胞，通过流式细胞技术检测鸡巨噬细胞表面特异性标记蛋白发现，84.9%的细胞为KUL01阳性细胞；鸡原代脾脏巨噬细胞对ALV-J易感，并且ALV-J可整合进鸡原代脾脏巨噬细胞基因组中；对感染ALV-J的鸡脾脏巨噬细胞进行形态观察，发现ALV-J感染导致鸡脾脏巨噬细胞形态逐渐萎缩直至死亡；ALV-J感染6 h、12 h、24 h及48 h可诱导鸡原代脾脏巨噬细胞炎性因子（IL-1β、IL-6）的表达显著上调，在ALV-J感染24 h、48 h诱导肿瘤抑制因子（TNF-α）的表达显著上调（P<0.05）；并且在早期（感染3 h）诱导干扰素（IFN-β）及干扰素刺激基因（CH25H、STAT1、PKR）表达，后期（感染48 h）抑制部分干扰素刺激基因（OAS、STAT1、ZAP、Mx）的表达。研究表明ALV-J感染鸡原代脾脏巨噬细胞早期可诱发强烈的天然免疫反应，后期可能通过抑制IFN-β及部分干扰素的表达实现免疫逃逸。
- 单位
