丝裂原诱导基因6在砷致人肝星状细胞活化及细胞外基质沉积中的作用

作者：阮文丽; 范丽丽; 徐慧芬; 宋倩; 何瑞; 刁珩; 张玉琼; 张爱华; 王大朋^*

来源：环境与职业医学, 2022, 39(02): 200-205.

• 丝裂原诱导基因6
• 亚砷酸钠
• 肝星状细胞
• 肝纤维化
• 细胞外基质

[背景]砷是一种环境毒物，长期或过量砷暴露可致机体肝纤维化损伤，其具体机制尚不清楚；丝裂原诱导基因6(Mig-6)在多种疾病或癌症中具有保护作用，但其在砷致肝纤维化损伤过程的作用尚不清楚。[目的]探讨Mig-6在亚砷酸钠(NaAsO2)致人肝星状细胞(HSC)活化及细胞外基质(ECM)沉积中的作用及机制。[方法]采用0、1.875、3.75、7.5、15μmol·L-1 NaAsO2处理体外常规培养的人肝星状细胞株(Lx-2)24 h，另以7.5μmol·L-1 NaAsO2处理Lx-2细胞0、12、24、48、72 h，到达处理终点收集细胞。进一步采用pcDNA3.1(+)/Mig-6质粒转染Lx-2细胞，并在此基础上以7.5μmol·L-1NaAsO2处理细胞24 h，另设空白对照组、pcDNA3.1(+)空载体转染组、pcDNA3.1(+)/Mig-6转染组、单独染砷组(7.5μmol·L-1)；收集各组细胞及培养上清，Western blotting法检测Mig-6及Lx-2细胞活化相关蛋白[α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)]表达水平，ELISA法检测培养细胞上清中ECM主要成分[透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(COL-Ⅳ)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)]的分泌水平。[结果] NaAsO2处理Lx-2细胞后，与对照组(1.000±0.000)比较，3.75、7.5、15μmol·L-1染砷组Mig-6蛋白表达水平降低(0.561±0.095、0.695±0.048、0.401±0.030)(P <0.05)；染砷24、48、72 h后Mig-6蛋白表达水平(0.856±0.036、0.515±0.077、0.491±0.060)均较0 h时(1.000±0.000)降低(P <0.05)。过表达Mig-6后，Lx-2细胞活化相关蛋白检测结果显示，与对照组比较，单独染砷组α-SMA和TGF-β1蛋白表达水平均升高(P <0.05)；而与单独染砷组比较，Mig-6过表达联合染砷组α-SMA、TGF-β1蛋白表达水平则降低(P <0.05);ELISA法检测结果显示，与对照组比较，单独染砷组HA、LN、PⅢNP、COL-Ⅳ分泌水平升高(P <0.05)；而与单独染砷组比较，Mig-6过表达联合染砷组HA、LN、PⅢNP、COL-Ⅳ分泌水平则降低(P <0.05)。[结论]砷可下调HSC中Mig-6蛋白表达水平，过表达Mig-6可逆转砷暴露所引起的HSC活化及ECM沉积，提示Mig-6在砷所致HSC激活及ECM沉积中具有保护作用。

• 单位
  贵州医科大学; 贵州省疾病预防控制中心