冷暴露和CL316243刺激小鼠脂肪组织内参基因的筛选

作者：范秀琴; 王瑞; 李苹; 唐甜甜; 杨梦铱; 周芯卉; 齐可民^*

来源：生物技术, 2021, 31(03): 239-272.

DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2021.03.0037

• 冷暴露
• CL316243刺激
• 小鼠
• 脂肪组织
• 荧光定量PCR
• 内参基因

[目的]筛选冷暴露和CL316243刺激时脂肪组织中稳定表达的内参基因。[方法]8～9周龄C57BL/6J雄性小鼠分成4组:冷暴露组、常温对照组、CL316243组和生理盐水对照组。将冷暴露组和常温对照组分别置于4℃和常温饲养6 h;给予CL316243组7 d皮下注射CL316243(1 mg/kg/d),生理盐水对照组注射相同体积的生理盐水。荧光定量PCR检测棕色和白色脂肪中10个内参基因的mRNA水平,采用geNorm、Normfinder、Best Keeper和Delta-Ct四种方法来评估内参基因表达的稳定性。[结果]稳定性综合排名前4的内参基因是:冷暴露时棕色脂肪中为YWHAZ、36B4、PPIA和HPRT;白色脂肪中为HPRT、YWHAZ、B2M和TBP。CL316243刺激时棕色脂肪中为PPIA、HPRT、YWHAZ和β-actin;白色脂肪中为PPIA、HPRT、TBP和18S。冷暴露和CL316243刺激时脂肪组织中配对变异值V2/3均小于0.15。[结论]冷暴露和CL316243刺激时脂肪组织中最佳内参基因的数量均为2个。冷暴露时脂肪组织最佳内参基因组合为YWHAZ和HPRT,CL316243刺激时脂肪组织最佳内参基因组合为PPIA和HPRT。

• 单位
  首都医科大学附属北京儿童医院