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摘要
旨在探究原花青素（procyanidins, PC）在玉米赤霉烯酮（zearalenone, ZEA）诱导牦牛颗粒细胞产生氧化损伤后，对颗粒细胞生长增殖、抗氧化性以及激素分泌的影响。本试验选取3～5岁的健康牦牛（n=3）,完成卵巢颗粒细胞的分离培养，并通过免疫荧光染色鉴定颗粒细胞纯度。通过CCK-8法分别比较不同浓度ZEA(0（对照组）、5、10、20、40、60、80和100μmol·mL-1)、不同浓度PC(0（对照组）、0.05、0.5、2.5、5、10、50和100μg·mL-1)以及50μmol·mL-1 ZEA+5μg·mL-1 PC联合处理对牦牛颗粒细胞活性的影响。通过ELISA法检测对照组（未添加ZEA及PC）、50μmol·mL-1 ZEA组和50μmol·mL-1ZEA+5μg·mL-1PC联合处理组牦牛颗粒细胞活性氧（reactive oxygen species, ROS）以及雌二醇（E2）水平。采用实时荧光定量PCR法检测不同组颗粒细胞中部分增殖生长、凋亡、抗氧化及E2合成相关基因的表达水平。结果显示，本研究所分离培养得到的细胞表达颗粒细胞标志蛋白FSHR,具有较高的纯度，可以满足后续试验要求。添加不同浓度ZEA后，颗粒细胞活力随着ZEA浓度的升高而显著降低（P-1),随着浓度的上升，PC对颗粒细胞的活力有显著提高作用（P-1时对细胞活力的提高作用最明显。与ZEA处理组相比，ZEA与PC联合处理后颗粒细胞的数量增加且细胞活力极显著提高（P2（P2合成相关基因STAR、CYP11A1及HSD3B的表达量显著上调（P2的分泌水平。综上所述，PC对ZEA诱导的牦牛颗粒细胞氧化损伤有一定保护作用。本研究为ZEA毒性的防治和畜牧业生产中PC的应用提供了一定的研究数据和理论支持。
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