稳定表达流感病毒基质蛋白2的哺乳动物细胞系的建立

作者：陈爱珺; 郭建强; 姚立红; 殷继永; 张智清

来源：病毒学报, 2013, (01): 7-11.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.002345

• 基质蛋白2
• 流感病毒
• 哺乳动物细胞系 Matrix protein 2
• Influenza virus
• Mammalian cell line

本研究构建了稳定表达甲型流感病毒基质蛋白2(M2)的哺乳动物细胞系。应用PCR方法扩增A/PR/8/34(H1N1)株流感病毒M2基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA5/FRT(pDF)上,构建出pDF-M2重组质粒。将鉴定正确的pDF-M2与表达Flp重组酶的pOG44质粒共转染Flp-In-CHO细胞,通过体内同源重组使目的基因整合到宿主细胞染色体上。筛选具有Hygromycin B抗性的重组细胞株命名为CHO-M2。以间接免疫荧光法(IFA)和Western blot法检测M2的表达,共获得15株高表达M2蛋白的重组细胞株。这些重组细胞株在连续培养10代后,PCR方法仍可检测到M2基因...

• 单位
  中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所