基于自噬探讨左归降糖通脉方对糖尿病合并脑梗死大鼠的神经保护作用机制

作者：李钰佳; 彭珣; 李定祥^*; 邓奕辉

来源：中药新药与临床药理, 2023, 34(02): 176-183.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2023.02.005

• 左归降糖通脉方
• 糖尿病合并脑梗死
• 自噬
• 微管相关蛋白轻链3
• p62
• 大鼠

目的 从自噬角度探讨左归降糖通脉方(熟地黄、枸杞子、山茱萸、黄芪、黄连等)对糖尿病合并脑梗死大鼠的神经保护作用机制。方法 将96只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、左归降糖通脉方组(24 g·kg-1)及二甲双胍+阿司匹林组(150 mg·kg-1+15 mg·kg-1)，每组24只。除假手术组大鼠外，其余大鼠采用高糖高脂饲料喂养4周后腹腔注射链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型，模型复制成功后开始灌胃给药，每日1次，连续5 d。末次灌胃后采用线栓法制备大脑中动脉栓塞大鼠模型。术后进行神经功能评分；采用TTC染色法测定脑梗死率；检测大鼠血糖值及糖化血清蛋白含量；HE染色观察缺血半脑皮质区组织损伤；ELISA法检测缺血侧大脑皮质组织中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量；Western Blot法检测皮质组织中微管相关蛋白轻链3(LC3)、p62蛋白表达情况；免疫荧光法检测皮质组织中LC3蛋白表达。结果 与假手术组比较，模型组大鼠的神经功能损伤评分、脑梗死率、血糖水平、治疗前后的体质量差值及糖化血清蛋白水平显著上升(P<0.01)；脑缺血侧皮质组织中IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著升高(P<0.01),LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达显著上调(P<0.01),p62蛋白表达显著下调(P<0.01),LC3荧光表达面积显著增加(P<0.01)。与模型组比较，左归降糖通脉方组大鼠的神经功能评分及脑梗死率明显下降(P<0.05)，血糖水平、治疗前后的体质量差值及糖化血清蛋白水平均显著降低(P<0.01)；皮质组织中IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著降低(P<0.01),LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达显著下调(P<0.01),p62蛋白表达显著上调(P<0.01),LC3荧光表达面积显著减少(P<0.01)。结论 左归降糖通脉方能降低糖尿病合并脑梗死大鼠的神经功能损伤，缩小脑梗死体积，降低血糖及糖化血清蛋白水平，减轻大鼠缺血侧大脑皮质炎性损伤，其机制与通过抑制大鼠皮质区细胞的过度自噬，减少炎症因子的释放有关。

• 单位
  湖南中医药大学