基于SPR技术高通量呼吸道病毒检测方法研究

作者：孙秋香; 王小华; 顾大勇

来源：国际检验医学杂志, 2016, 37(15): 2068-2073.

• 表面等离子共振
• 呼吸道病毒
• 高通量
• 免标记
• 基因芯片

目的结合表面等离子共振(SPR)和基因芯片技术优势,针对9种常见呼吸道病毒[包括A型、B型流感病毒(Influ A,B),甲型H1N1,呼吸道融合病毒(RSV),副流感病毒13型(PIV1、2、3),腺病毒(ADV)以及引发严重急性呼吸综合征的冠状病毒(SARS)],构建特异性强、通量高的生物传感器方法。方法首先利用软件premier 5等在保守序列上设计相关病毒的特异性引物及探针;将所设计的9种相应呼吸道病毒的探针固定于化学修饰后的SPR芯片的特定区域,利用SPR技术实时监测探针与PCR产物的杂交过程,最后通过生物素与链霉亲和素系统实现信号的放大。结果设计的基因芯片可以高通量地检测9种呼吸道病毒,具有很好的检测特异性;芯片表面通过一定的再生条件后可以重复利用,避免芯片批间差对结果的影响;检测灵敏度都达到纳摩尔级。结论初步研究结果表明,利用SPR传感技术建立高通量检测呼吸道病毒的检测方法具有一定的实用性和可行性,有望成为快速、大规模、高通量筛查呼吸道病毒感染的手段,具有较好的应用前景。

• 单位
  深圳市检验检疫科学研究院; 重庆市公安局