结核分枝杆菌复合群四重PCR检测方法的建立及应用

作者：程实; 陈伟; 陈颖钰; 陈军; 苗北平; 郭爱珍

来源：中国人兽共患病学报, 2012, (04): 333-337.

• 结核
• 结核分枝杆菌
• 牛分枝杆菌
• 多重PCR
• 鉴别诊断 Tuberculosis
• Mycobacterium tuberculosis
• Mycobacterium bovis
• multiplex PCR
• differential diagnosis

目的本文旨在建立一种能快速鉴定结核分枝杆菌复合群不同成员的多重PCR方法。方法针对结核分枝杆菌复合群4个特异性基因16sRNA、IS6110、RV2652、RV3873设计引物,通过筛选优化引物浓度、退火温度、Mg2+浓度和dNTP浓度,确定了最佳反应条件。结果扩增产物的大小分别为824bp、621bp、418bp和254bp,能特异性检测并鉴别出非结核分枝杆菌(824bp 1条带)、卡介苗(824bp和621bp 2条带)、牛分枝杆菌(824bp、621bp和254bp 3条带)和结核分枝杆菌(4条带)。检测灵敏度达到125fg。对42份牛结核菌素皮内变态反应阳性牛的肺淋巴结样本和115份肺...

• 单位
  农业微生物学国家重点实验室; 华中农业大学