糖皮质激素对体外中央记忆性CD8+ T淋巴细胞的诱导分化作用

作者：陈颖诗; 张旭; 彭治林; 罗海华; 张辉; 张译文^*

来源：中国病理生理杂志, 2018, 34(09): 1666-1671.

DOI：10.3969/j.issn.1000-4718.2018.09.021

• + T细胞" name="keyword">中央记忆性CD8+ T细胞
• 糖皮质激素
• 免疫治疗
• 细胞分化

目的:以糖皮质激素对人CD8+ T淋巴细胞的诱导作用为线索,探究其对体外CD8+ 中央记忆性T淋巴细胞(central memory T cells,TCM)的诱导分化作用,以期为CD8+ TCM过继性免疫疗法提供新的扩增方案。方法:通过密度梯度离心法分离健康人外周血单个核细胞,经磁珠和流式细胞术分选出初始CD8+ T细胞,将细胞使用细胞因子激活之后分为对照组和实验组,在实验组中加入不同浓度的2种糖皮质激素(醋酸可的松和氢化可的松),进行体外培养,最后通过流式细胞术检测2组细胞中CD8+ TCM的诱导分化情况,并通过CFSE染色判断细胞增殖情况,通过早期凋亡试剂Annexin V染色判断药物本身对CD8+ T细胞的毒性作用。结果:浓度梯度实验发现,1μmol/L醋酸可的松对CD8+ TCM表现出良好的诱导效果,氢化可的松在0.5μmol/L的诱导效果较好。分别在体外培养的第3天和第6天,CFSE染色法检测细胞的增殖情况,经统计学分析发现实验组和对照组之间的差异无统计学显著性,表明糖皮质激素不影响细胞的自然增殖。Annexin V染色法表明,这2种药物无显著的促进凋亡作用,对淋巴细胞毒性小。结论:糖皮质激素在体外对人CD8+ TCM具有良好的诱导作用。这为改善过继免疫治疗中TCM的体外扩增提供新的参考方法,并且在理论上加深对糖皮质激素生物学功能的理解。

• 单位
  中山大学中山医学院