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摘要
目的：基于四氯化碳(CCl4)大鼠肝纤维化模型，探究清肝健脾活血方对肝纤维化大鼠M1/M2型巨噬细胞极化的影响。方法：按剂量2.0 mL·kg-1给大鼠腹腔注射40%CCl4-橄榄油混悬液，每周2次，连续注射8周，建立大鼠肝纤维化模型，造模成功后随机分为模型组、清肝健脾活血方组(32.084 g·kg-1)、鳖甲煎丸组(0.925 5 g·kg-1)，每组12只。空白组腹腔注射等量橄榄油。给药组按剂量灌胃给予相应药液，空白组和模型组给予相同剂量纯净水，1次/d，连续给药4周后取大鼠肝组织进行苏木素-伊红(HE)、马松(Masson)染色观察病理改变，并检测各组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平，采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定肝组织白细胞介素(IL)-6、IL-12、IL-10、IL-1β、转化生长因子-β1(TGF-β1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，免疫组化法(IHC)检测巨噬细胞CD86、CD206蛋白表达，蛋白免疫印迹法(Western blot)、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg-1)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白及mRNA表达水平。结果：与空白组比较，模型组肝细胞板排列不规整，局部可见炎症细胞浸润、纤维增生，血清ALT、AST水平显著升高(P<0.01)，肝组织炎症因子IL-1β、IL-6、IL-12、TGF-β1、TNF-α水平，CD86、CD206蛋白表达水平，iNOS、NF-κB p65蛋白及mRNA,p-p38 MAPK蛋白、p38 MAPK mRNA水平均明显升高(P<0.05,P<0.01)，炎症因子IL-10,Arg-1蛋白及mRNA水平明显降低(P<0.05,P<0.01)；与模型组比较，清肝健脾活血方组肝细胞纤维化程度减轻，血清ALT、AST水平显著降低(P<0.01)、肝组织炎症因子IL-1β、IL-6、IL-12、TGF-β1、TNF-α水平，CD86表达水平，iNOS、NF-κB p65蛋白及mRNA水平，p-p38 MAPK蛋白及p38 MAPK mRNA水平明显降低(P<0.05,P<0.01)，炎症因子IL-10,CD206表达水平、Arg-1蛋白及mRNA水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论：清肝健脾活血方可能通过抑制促炎M1型巨噬细胞激活，诱导M2型巨噬细胞分泌抗炎细胞因子，减少促纤维化细胞因子释放，促进肝巨噬细胞M1向有利于组织修复的M2型极化，从而发挥抗炎和抗肝纤维化作用。
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