人RASSF1A基因的真核表达载体的构建及其表达

作者：陈叶珊; 王涛; 刘伟

来源：医学信息(上旬刊), 2009, 22(02): 238-241.

• RASSF1A
• 真核表达载体
• 抑癌基因

目的通过构建人RASSF1A基因的真核表达载体,为研究其在肿瘤细胞凋亡、细胞周期阻滞、细胞增殖抑制等方面奠定基础。方法采用RT-PCR从人外周血的单个核细胞RNA中扩增出人RASSF1A基因的全长cDNA,利用DNA重组技术将其插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)中获得重组质粒。利用脂质体将重组质粒转染入人鼻咽癌细胞株CNE-2中,采用RT-PCR,Western-blot检测RASSF1A的瞬时表达。结果酶切图谱分析及基因测序证明人RASSF1A基因已被完整、正确地插入到pcDNA3.1(+)质粒载体中,RT-PCR及Western-blot结果显示转染细胞的RASSF1A表达水平上调。结论成功构建了RASSF1A基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/RASSF1A。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院