伴CSF1R-Y571D突变的急性髓系白血病细胞系GDM-1的增殖机制

作者：曹琼; 徐凝馨; 李小文; 吴昊; 郝建卿; 覃艳红; 李莉^*

来源：基础医学与临床, 2021, 41(01): 44-49.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2021.01.010

• 蛋白激酶抑制剂
• GDM-1
• 集落刺激因子1受体
• linifanib
• bosutinib

目的通过蛋白激酶抑制方法研究伴集落刺激因子-1受体(CSF1R)突变的急性髓系白血病细胞系GDM-1的增殖机制。方法按照处理方式不同将GDM-1细胞分为实验组和对照组,将10种不同的蛋白激酶抑制剂作用于实验组,对照组仅做DMSO处理;CCK8法检测细胞增殖抑制情况;Western blot检测蛋白激酶抑制剂作用于GDM-1后,关键激酶的磷酸化水平的改变;细胞因子M-CSF单独或与蛋白激酶抑制剂共同作用于GDM-1细胞,采用CCK8法进行检测细胞增殖水平。结果蛋白激酶抑制分析显示明显抑制GDM-1细胞增殖的药物有dasatinib(IC50=0.01μmol/L)、bosutinib(IC50=0.07μmol/L)、linifanib(IC50=0.13μmol/L)及sorafenib (IC50=0.12μmol/L)。Western blot显示,与对照组相比,linifanib作用于GDM-1后,SRC、ERK磷酸化水平明显降低(P<0.01)。在低浓度FBS培养时,细胞因子M-CSF能够刺激伴CSF1R突变型细胞系GDM-1的增殖,其增殖水平为对照组的11.3倍;M-CSF联合bosutinib作用于GDM-1,细胞增殖明显被抑制(P<0.001),而M-CSF联合HG6-64-1作用于GDM-1,与仅用M-CSF组相比细胞增殖不受影响。结论 GDM-1细胞中CSF1R-Y571D突变使CSF1R活性增高,并主要通过激活Src及MAPK信号通路来促进细胞增殖。

• 单位
  基础医学院; 第二临床医学院; 山西医科大学