C7orf69基因的克隆表达及生物信息学分析

作者：顾红岩; 孟雪; 李辉; 郝晓花; 李兴旺; 魏红山

来源：中国肝脏病杂志(电子版), 2013, (04): 16-21.

DOI：10.3969/j.issn.1674-7380.2013.04.004

• C7orf69
• 基因
• 分泌蛋白 C7orf69
• Gene
• Secretory protein

目的体外克隆表达并纯化C7orf69重组蛋白,对C7orf69蛋白进行生物信息学分析。方法 PCR扩增C7orf69目的基因片段,构建原核表达载体,转化BL21,IPTG诱导目的蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定,Ni-NTA纯化目的蛋白。结果扩增获得序列完全正确的C7orf69基因片段(自然变异体),重组蛋白以包涵体的形式高效表达,在非变性条件下获得较高纯度的重组蛋白。生物信息学软件预测C7orf69蛋白(含信号肽)含有PKC、CK2磷酸化位点和N-十四烷基化位点。结论成功的对分泌蛋白C7orf69进行了基因克隆、表达与初步纯化,为其进一步的功能研究奠定了坚实的基础。

• 单位
  首都医科大学附属北京地坛医院; 北京大学