尿液多种microRNA检测方法的建立及其在膀胱癌诊断中的应用研究

作者：李莉; 卞炳贤; 张良; 沈立松

来源：诊断学理论与实践, 2017, 16(01): 93-97.

DOI：10.16150/j.1671-2870.2017.01.018

• 膀胱癌
• 微小RNA
• 尿液
• 实时聚合酶链反应

目的:建立尿液中8种微小RNA(micro RNA,miRNA)的检测方法 ,明确其分布规律及其在膀胱癌中的变化。方法:选取15名健康人的晨尿及随机尿液,以及15例确诊膀胱癌患者的随机尿液,进行总RNA提取,然后反转录得到cDNA,用荧光实时PCR法扩增8种膀胱癌相关miRNA,分别为miR-126、miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-182、miR-183、miR-429和miR-141,探讨晨尿与随机尿、尿液浓缩前与浓缩后对尿液miRNA浓度的影响。比较正常对照组与膀胱癌患者尿液中上述8种miRNA的表达差异,并采用受试者工作特征曲线分析尿液miRNA检测在膀胱癌诊断中的价值。结果:浓缩尿液组的6种miRNA(miR-126、miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-429和miR-141)浓度显著高于未浓缩组(P<0.05),而浓缩晨尿组的8种miRNA浓度与浓缩随机尿组间比较无统计学差异(P>0.05)。与正常对照相比较,miR-126、miR-182、miR-183及miR-141的浓度在膀胱癌组中显著升高(P<0.05),而miR-200a浓度在膀胱癌组中显著降低(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析显示,单独检测尿液miRNA对于膀胱癌的诊断缺乏有效性,而对5种尿液miRNA(miR-126、miR-200a、miR-182、miR-183和miR-141)进行联合检测则可显著提高膀胱癌诊断的灵敏度和特异度。结论:尿液中稳定存在多种miRNA,尿液中多项miRNA的联合检测可能有望成为诊断膀胱癌的有效指标。

• 单位
  上海交通大学医学院附属新华医院