miR-100-5p靶向mTOR信号通路调控人非小细胞肺癌A549细胞自噬

作者：桂坤; 黄昱; 王美锦; 欧阳伟炜^*

来源：中国老年学杂志, 2021, 41(23): 5301-5305.

• miR-100-5p
• A549细胞
• mTOR
• 自噬

目的探讨miR-100-5p靶向调控mTOR信号通路对人非小细胞肺癌A549细胞自噬的影响。方法采用A549细胞,实验设置对照组、转染miR-100-5p mimics组、转染miR-100-5p inhibitor组及其对应的无义核酸序列组(mimics NC和inhibitor NC),通过Real time-PCR检测各组细胞中miR-100-5p及自噬相关基因mTOR、Beclin1、LC3及Bcl-2 mRNA相对表达水平;流式细胞术检测瞬时转染后各组细胞的凋亡情况;Western印迹检测miR-100-5p mimics转染48 h后A549细胞中自噬蛋白mTOR的表达情况;最后,通过预测软件结合双荧光素酶报告实验验证miR-100-5p和mTOR之间的靶向关系。结果 A549细胞经过瞬时转染后,对照组、mimics NC组、inhibitor NC组的miR-100-5p、自噬相关基因mTOR、Beclin1、LC3和Bcl-2表达量差异无统计学意义(P>0.05),与mimics NC组比,mimics组miR-100-5p、自噬相关基因表达量显著上调(P<0.05),与inhibitor NC组比,inhibitor组miR-100-5p、自噬相关基因表达量显著下调(P<0.05),与mimics组比,inhibitor组miR-100-5p、自噬相关基因表达量显著下调(P<0.05)。对照组、mimics NC组、mimics组、inhibitor NC组、inhibitor组A549细胞转染48 h细胞凋亡比例,各组差异有统计学意义(F=35.169,P<0.001)。mimics组A549细胞转染48 h细胞凋亡比例显著高于其余4组,差异有统计学意义(均P<0.05)。3组mTOR蛋白水平比较:mimics组>对照组>mimics NC组(均P<0.05)。结论 miR-100-5p靶向mTOR调控A549细胞自噬促进细胞凋亡,提示miR-100-5p可作为肺癌的临床治疗生物治疗的靶点。

• 单位
  贵州医科大学; 贵州省肿瘤医院