基于二硫化钨和核酸外切酶Ⅲ的荧光法高灵敏检测血液中汞离子

作者：耿琴^*

来源：中国药师, 2019, 22(04): 778-780.

• 荧光法
• 二硫化钨
• 核酸外切酶Ⅲ
• 汞离子
• 血浆

目的:将信号放大策略用于荧光法实现血液中低浓度汞离子的检测。方法:将汞离子加入到富含胸腺嘧啶且3’端荧光标记的单链DNA溶液中,汞离子介导该特异序列形成分子内的双链结构,且该双链DNA具有3’凹端,因此能够被核酸外切酶Ⅲ水解并释放出荧光标记的单核苷酸,当加入二硫化钨(WS2)后,荧光标记的单核苷酸不能被二硫化钨吸附从而荧光信号明显增加。对WS2和ExoⅢ的量进行优化考察,对方法的线性、检测限、特异性等性能进行验证。3个不同浓度汞离子在血浆样品中的加样回收率也进行验证。结果:汞离子在1～30 nmol·L-1和30～250 nmol·L-1范围内线性关系良好,r分别为0.993 6和0.995 2,检测限为0.1 nmol·L-1,加样回收率分别为110.0%,116.0%,90.9%,RSD分别为16.5%,18.7%,17.8%(n=6)。结论:建立的荧光法可以实现血液中低含量汞离子的检测,为临床上检测汞离子提供一种新方法。

• 单位
  武汉大学中南医院