摘要

目的探讨胎盘间充质干细胞培养液中血管内皮生长因子(VEGF)对体外培养卵巢早衰模型大鼠卵巢抗凋亡因子B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)表达的影响。方法收集胎盘间充质干细胞单独培养1、3、4及6 d的培养液,与卵巢早衰模型大鼠卵巢组织共培养4 d,分别用Real-time PCR、组织免疫组化和Western blot检测其旁分泌VEGF对卵巢早衰模型大鼠卵巢BCL-2表达的影响。结果胎盘间充质干细胞培养不同时间(6、12、24、36、48、60、72 h)的上清液中VEGF分泌水平用ELISA检测结果显示,培养6与12 h分泌水平相比,差异无统计学意义;随着培养时间延长,VEGF分泌水平逐渐增加,与培养24 h相比,差异有统计学意义(P<0.05);培养60 h以后可能达到分泌的平台期;共培养前后2组免疫组化Bcl-2蛋白表达检测显示大鼠卵巢皮质片颗粒细胞均可见棕褐色阳性染色,共培养前卵巢颗粒细胞凋亡细胞分布范围广,有时密集成堆;共培养后凋亡细胞分布数目较少,散在分布。Real-time PCR检测结果显示,与卵巢共培养4 d BCL-2基因表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05); Western blot检测共培养后BCL-2蛋白表达增加,在共培养到60 h时候达到高峰,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论人胎盘间充质干细胞与卵巢早衰大鼠卵巢共培养能明显促进卵巢抗凋亡因子BCL-2表达。

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