摘要
构建含有靶向satb1基因的siRNA质粒,体外观察对乳隙癌细胞系MDA-MB-231的SATB1 mRNA以及蛋白质表达的影响.设计合成三对靶向人源satb1基因的siRNA,并分别克隆在质粒载体上,在脂质体的介导下转染高表达SATB1的乳腺癌细胞系MDA-MB-231.运用Real Time-PCR方法分析SATB1 mRNA的表达情况,Western-Blot方法检测蛋白的表达量.结果表明:经过酶切鉴定和测序证实三个重组质粒psiS823、psiS2567、psiS3373分别构建成功,转染乳腺癌细胞系MDA-MB-231能明显抑制SATB1mRNA及蛋白的表达.说明本试验成功构建的重组质粒psiS823、psiS2567、psiS3373都能有效降低的人乳腺癌细胞MDA-MB-231中SATB1的表达,为SATB1高表达的乳腺癌基因治疗提供了新方法.
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