琼脂磁珠消减SELEX技术筛选HIV gp41抗原适配体（英文）

作者：栗坤; 修尘林; 高立明; 石明; 翟越

来源：南方医科大学学报, 2016, 36(12): 1592-1598.

• HIV gp41抗原
• 消减SELEX技术
• DNA适配体识别

目的通过消减SELEX技术筛选得到高特异性、强亲和力的HIV gp41抗原适配体,为HIV的早期诊断提供了新的检测技术。方法以琼脂磁珠为载体,HIV gp41抗原为靶标分子,利用消减SELEX技术和实时定量-PCR技术,筛选得到HIV gp41抗原适配体。结果通过6轮筛选,筛选得到的次级ss DNA库通过PCR扩增得到ds DNA,ds DNA与p MDTM 18载体链接,进行克隆、测序,获得4条HIV gp41抗原适配体。获得的4条适配体亲和力(Kd)均在纳摩尔水平,其中15号适配体的亲和力最强,特异性检测表明筛选得到的适配体几乎只与HIV gp41抗原结合,不与其他非特异性蛋白结合。结论利用随机单链寡核苷酸文库成功获得与HIV gp41抗原特异性结合的适配体,所获得的适配体具有拮抗HIV gp41抗原的能力。

• 单位
  燕山大学; 环境与化学工程学院; 秦皇岛市第一人民医院