水牛iPS细胞转录因子Sox2及协助蛋白HA2-TAT的原核表达

作者：伏彭辉; 石德顺; 邓彦飞; 刘金凤; 刘庆友

来源：中国兽医学报, 2011, (08): 1157-1161.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2011.08.021

• 水牛
• Sox2
• HIV TAT
• 融合表达 buffalo
• Sox2
• HIV TAT
• fusion expression

为探讨干细胞转录因子与穿膜肽融合表达蛋白对水牛体细胞诱导重编程的可行性,本试验对水牛iPS细胞转录因子Sox2与细胞穿膜肽HIV TAT进行融合表达,以获得具有自主穿膜功能的Sox2蛋白,建立非转基因水牛iPS生产技术体系。首先人工合成了HA2-TAT序列,并将pET-32a( )质粒改造为pET-HA2-TAT基础表达载体,再通过双酶切定向克隆将水牛Sox2基因插入pET-HA2-TAT得到原核表达载体pET-NLS-Sox2-TAT;重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,用SDS-PAGE电泳和Western blot检测融合蛋白表达,再用Ni 2 柱进行纯化融合蛋白。结...

• 单位
  广西大学; 西南大学荣昌校区