核糖体蛋白S6激酶1抑制剂对气道上皮干/祖细胞增殖及分化功能的影响

作者：李敏敏; 李宽; 孙昕; 吴琦; 陈怀永^*

来源：天津医药, 2019, 47(05): 449-453.

• mTOR/S6K1信号通路
• 气道干细胞
• 细胞增殖
• 细胞分化

目的研究mTOR信号通路下游元件核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)抑制剂PF-4708671对气道干/祖细胞增殖与分化功能的影响。方法准备10只C57BL/6小鼠,采用流式细胞分选技术将气道干细胞(vClub)和气道祖细胞(Club)从小鼠气道分选出来;采用类器官培养技术分别把vClub细胞、Club细胞和成纤维细胞(MLg)混合培养。细胞设0、4、20、100 nmol/L PF-4708671处理组,培养第8天时显微镜下观察克隆生长情况,统计克隆形成数量;第10天时荧光定量PCR检测S6K1激酶基因Rps6kb1、Club细胞标志物细胞色素氧化酶(Cyp2f2)、纤毛细胞标志物乙酰化微管蛋白(Act)和叉头框转录因子J1(Foxj1),杯状细胞标志物氯化物通道钙活化家族成员3(Clca3)叉头框转录因子a3(Foxa3)的mRNA表达情况。结果不同浓度的PF-4708671对vClub细胞克隆数量无明显影响(P>0.05),而4、20、100 nmol/L PF-4708671浓度组Club细胞克隆数量均较0 nmol/L组减少(P<0.05)。不同浓度的PF-4708671对vClub向Club细胞的分化无明显影响,其特征分子Cyp2f2在mRNA表达水平差异方面无统计学意义。PF-4708671对Club细胞向纤毛细胞和杯状细胞的分化能力均无明显影响,4组间2种细胞的标志物Act、Foxj1及Clca3、Foxa3表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 mTOR/S6K1信号通路对小鼠气道干/祖细胞的增殖功能呈正调控作用,对其分化功能影响甚微。

• 单位
  天津医科大学; 天津大学