circ＿WBSCR17通过调节miR-30a-5p/JAK1轴减轻高糖诱导的人肾小球系膜细胞纤维化和炎症反应

作者：董海芸; 韩芳; 齐一舟; 梅峰^*

来源：安徽医科大学学报, 2023, 58(10): 1756-1768.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.10.025

• circ＿WBSCR17
• miR-30a-5p
• JAK1
• 人肾小球系膜细胞
• 纤维化
• 炎症反应

目的 探讨circ＿WBSCR17通过调节miR-30a-5p/JAK1轴对高糖诱导的人肾小球系膜细胞纤维化和炎症的影响。方法 将人肾小球系膜细胞HMCL分为NG组(5.5 mmol/L葡萄糖处理HMCL细胞)、HG组(30 mmol/L葡萄糖处理细胞)、si-NC组(30 mmol/L葡萄糖+转染si-NC)、si-circ＿WBSCR17组(30 mmol/L葡萄糖+转染si-circ＿WBSCR17)、si-circ＿WBSCR17+inhibitor-NC组(30 mmol/L葡萄糖+si-circ＿WBSCR17和inhibitor-NC共转染)、si-circ＿WBSCR17+miR-30a-5p inhibitor组(30 mmol/L葡萄糖+si-circ＿WBSCR17和miR-30a-5p inhibitor共转染);RT-qPCR检测细胞中circ＿WBSCR17、miR-30a-5p的表达；CCK-8法检测细胞增殖；流式细胞仪检测细胞凋亡；ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-8表达水平；Western blot检测细胞中JAK1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bax、转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原蛋白(collagenⅣ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达；荧光原位杂交(FISH)实验检测circ＿WBSCR17的分布情况，双荧光素酶报告基因实验分别验证circ＿WBSCR17和miR-30a-5p、JAK1的关系。结果 与NG组比较，HG组HMCL细胞增殖能力降低，TNF-α、IL-6和IL-8水平、p-JAK1/JAK1、p-STAT1/STAT1、p-STAT3/STAT3、Bax、TGF-β1、FN、collagenIV、α-SMA蛋白表达升高(P<0.05);与HG组和si-NC组比较，si-circ＿WBSCR17组HMCL细胞中miR-30a-5p表达、OD450值、PCNA表达升高，TNF-α、IL-6和IL-8水平、circ＿WBSCR17、p-JAK1/JAK1、p-STAT1/STAT1、p-STAT3/STAT3、Bax、TGF-β1、FN、collagenIV、α-SMA表达降低(P<0.05);抑制miR-30a-5p减弱了敲低circ＿WBSCR17对HMCL细胞增殖的促进作用，增强了细胞凋亡、细胞纤维化和炎症反应；FISH实验证实circ＿WBSCR17主要分布在细胞质中；双荧光素酶报告基因实验证实circ＿WBSCR17、JAK1与miR-30a-5p存在靶向调控关系。结论 敲低circ＿WBSCR17可通过调节miR-30a-5p/JAK1轴，进而减轻高糖诱导的人肾小球系膜细胞纤维化和炎症。

• 单位
  青海大学附属医院; 昆明医科大学海源学院