PTEN在糖尿病因素削弱缺氧后处理对心肌细胞保护效应中的作用:与GSK-3β介导的线粒体凋亡途径的关系

作者：薛锐; 夏中元; 雷少青; 赵博; 孟庆涛; 李维; 周斌

来源：中华麻醉学杂志, 2017, 37(01): 108-111.

• 糖原合成酶激酶3
• 缺氧
• 糖尿病
• 肌细胞,心脏
• 再灌注损伤
• 后处理
• PTEN

目的评价PTEN在糖尿病因素削弱缺氧后处理对心肌细胞保护效应中的作用及其与糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)介导的线粒体凋亡途径的关系。方法高糖培养(30 mmol/L)24 h的H9c2细胞,采用随机数字表法分为6组(n=5):常氧组(N组)、缺氧复氧组(H/R组)、缺氧后处理组(HPO组)、PTEN基因沉默常氧组(P-N组)、PTEN基因沉默缺氧复氧组(P-H/R组)和PTEN基因沉默缺氧后处理组(P-HPO组)。H9c2细胞置于培养箱(95%N2+5%CO2)孵育4 h再置于常氧培养箱(90%O2+10%CO2)孵育2 h建立缺氧复氧模型。于复氧前行3个循环的复氧5 min/缺氧5 min进行缺氧后处理。于复氧末,采用ELISA法检测上清液LDH水平,JC-1荧光法测定线粒体膜电位的变化,AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测PTEN和磷酸化GSK-3β(pGSK-3β)的表达。结果与N组比较,H/R组和HPO组LDH释放量、JC-1单聚体/多聚体比值和细胞凋亡率增加,PTEN表达上调(P<0.05);H/R组与HPO组上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05);与HPO组比较,P-HPO组LDH释放量和JC-1单聚体/多聚体比值和细胞凋亡率降低,PTEN表达下调,p-GSK-3β表达上调(P<0.05)。P-N组与N组比较,P-H/R组与H/R组比较,PTEN表达下调,其他指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PTEN参与了糖尿病因素削弱缺氧后处理对心肌细胞的保护效应,机制与其激活GSK-3β调控的线粒体凋亡途径有关。

• 单位
  武汉大学人民医院