新型冠状病毒S蛋白抗体的制备及初步应用

作者：徐康维; 何蕊; 权娅茹; 苏喆; 王剑锋; 赵慧; 李长贵^*

来源：中国生物制品学杂志, 2021, 34(07): 857-861.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003380

• 新型冠状病毒
• 抗血清效价
• 酶联免疫吸附试验
• 抗原含量

目的制备新型冠状病毒S蛋白抗体,初步建立检测新型冠状病毒灭活疫苗抗原含量的方法。方法使用新型冠状病毒重组S蛋白分别免疫羊和兔,获得抗血清。采用间接ELISA法和微量中和试验检测抗血清效价,免疫印迹试验检测抗体特异性。采用蛋白G纯化树脂分别对羊和兔抗血清进行亲和层析纯化,获得抗体。以纯化后的羊抗体作为包被抗体,兔抗体作为显示抗体,建立新型冠状病毒灭活疫苗抗原含量检测方法。结果对羊进行4次免疫后,抗血清ELISA效价达220 000,中和抗体效价达1 536。对兔进行3次免疫后,抗血清ELISA效价达220 000,中和抗体效价达4 096。羊和兔抗体均可与新型冠状病毒S蛋白特异性结合。应用纯化后的抗体,成功建立了检测抗原含量的双抗体夹心ELISA方法,该方法线性良好,R2> 0.99,可用于新型冠状病毒灭活疫苗原液抗原含量的检测。结论成功制备了羊和兔抗新型冠状病毒S蛋白高效价抗体,并初步建立了新型冠状病毒灭活疫苗抗原含量检测的双抗体夹心ELISA方法。

• 单位
  中国食品药品检定研究院