摘要
目的采用反义RNA技术,构建人FasL反义RNA重组逆转录病毒载体。以FasL表达阳性的人食管癌细胞株TE11为模型,研究反义RNA重组逆转录病毒表达载体对细胞FasL的阻断作用。方法将人FasL全基因序列的DNA片段反向插入逆转录病毒pLXSN质粒上的XhoⅠ和BamHⅠ位点间,建立重组质粒pL(FasL-AS)SN。将pL(FasL-AS)SN导入包装细胞PA317中,经G418筛选后收获培养上清,转染TE11细胞,建立TE11-hFasL-AS细胞系。用PCR技术检测pL(FasL-AS)SN中目的基因FasL的插入及其在TE11细胞中的整合;用RT-PCR法检测TE11细胞经重组病毒感...
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单位河北医科大学第四医院; 承德医学院附属医院