摘要
目的探讨miR-30a-5p对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖凋亡的影响及其机制。方法 用实时荧光定量PCR检测喉癌及癌旁组织中miR-30a-5p的表达;将Hep-2细胞分为NC组(转染miR-30a-5p mimics阴性对照)、miR-30a-5p组(转染miR-30a-5p mimics)、anti-NC组(转染miR-30a-5p inhibitor阴性对照)和anti-30a-5p组(转染miR-30a-5p inhibitor),MTT实验、平板克隆形成实验和Annexin V-FITC/PI 双染实验分别检测细胞增殖、克隆形成和细胞凋亡情况。双荧光素酶报告基因实验检测miR-30a-5p和SOX9的靶向关系。结果与癌旁组织表达量(1.00±0.10)相比,喉癌组织中miR-30a-5p的表达水平(0.37±0.03)显著降低(P<0.05)。与NC组相比,miR-30a-5p组细胞活性(48小时:0.42±0.03 vs 0.58±0.04)降低,细胞克隆数(75.36±6.85 vs 136.25±10.50)降低,细胞凋亡率[(23.86±2.21)% vs(9.95±1.16)%]升高(P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果显示,转染SOX9-WT质粒的Hep-2细胞荧光素酶活性明显降低(P<0.05),而转染SOX9-MUT质粒的Hep-2细胞荧光素酶活性无显著变化。anti-miR-30a-5p组对Hep-2细胞的作用与miR-30a-5p组相反。结论miR-30a-5p可能通过靶向下调SOX9抑制喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖并促进细胞凋亡。
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