miR-27a与SCF靶向关系鉴定

作者：赵园园; 孟金柱

来源：江苏农业学报, 2018, 34(02): 271-275.

• miR-27a
• SCF
• 靶向关系

为确定miR-27a与SCF的靶向关系,剪取成年棕色小鼠和灰色小鼠的皮肤组织,q RT-PCR检测miR-27a和SCF的表达量,选用Pic Tar、Target Scan和DIANA-micro T 3个数据库对miR-27a进行靶基因预测,构建miR-27a的真核表达载体和SCF 3’UTR(含种子序列)的双荧光表达载体,并对种子序列进行突变处理,以miR-27a过表达载体或NC载体(空载)组合SCF 3’UTR双荧光报告载体或SCF 3’UTR的突变载体共转染HEK 293 T细胞,48 h后检测双荧光素酶活性。q RT-PCR结果显示,miR-27a在灰色小鼠皮肤中的表达量极显著高于棕色小鼠(P<0.01),而SCF在棕色小鼠皮肤中的表达量显著高于灰色小鼠(P<0.05);3个数据库的分析结果均显示,SCF是miR-27a的靶基因;双荧光报告试验结果显示,miR-27a能显著抑制双荧光活性,即miR-27a能与SCF 3’UTR的种子序列结合。综上所述,SCF是miR-27a的靶基因。

• 单位
  铜仁学院