抗人CD80单链抗体的构建、表达及与抗原结合的特性分析

作者：陈昌友; 郭静雅; 陈永井; 陈明心; 孙杰; 张彦军; 黄赛男; 朱华亭; 邱玉华

来源：中国免疫学杂志, 2011, (02): 153-157.

• CD80
• 单链抗体
• 真核表达 CD80
• ScFv
• Eukaryotic expression

目的:构建及表达抗人CD80单链抗体(ScFv),并初步研究其生物学功能。方法:采用RT-PCR法从分泌鼠抗人CD80mAb的杂交瘤细胞株(4E5)中克隆VH和VL基因。用重叠延伸拼接PCR方法构建具有前导肽的L-VH-Linker-VL单链抗体基因,并亚克隆至pIRES2-EGFP表达载体,脂质体法转染中华仓鼠卵巢细胞(CHO),G418加压筛选。纯化抗CD80-ScFv,并分析其对膜型CD80的识别。竞争抑制实验分析抗CD80-ScFv与相应抗原的结合能力。MTT法体外分析抗CD80-ScFv对CD80介导的共刺激信号的阻断作用。结果:构建的抗CD80-ScFv基因全长为828 bp,经测...

• 单位
  中国科学院; 河南中医学院第一附属医院; 苏州大学