摘要
目的 探讨简便、快速定量检测氯霉素(CA)全抗原结合比的方法.方法 以牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白,采用混合酸酐法将之与氯霉素琥珀酸酯(CA-HS)偶联,合成CA-BSA全抗原.应用紫外分光光度法对CA-BSA 全抗原进行定性鉴定;分别采用自行改进的三硝基苯磺酸(TNBS)法和紫外分光光度法对CA-BSA 全抗原结合比进行定量检测.结果 紫外分光光度法检测显示CA-BSA 的最大吸收峰高于相同蛋白浓度的BSA 最大吸收峰,表明CA-BSA 全抗原偶联成功.TNBS 法测得的CA-BSA 全抗原结合比为26,紫外分光光度法测得的CA-BSA 全抗原结合比为23,两种方法的检测结果基本一致.结论 TNBS 法和紫外分光光度法用于氯霉素全抗原结合比的定量检测均具有快速、灵敏、方便和可靠的特点.TNBS 法对半抗原在紫外区无吸收的全抗原结合比测定也可以胜任,因此适用范围更为广泛.
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单位广东药学院