钙池操纵性钙内流对特应性皮炎上皮屏障功能的影响

作者：曹灿; 刘光辉; 王畅畅; 马如雪; 贾欣睿; 钟剑; 高亚东^*

来源：武汉大学学报(医学版), 2023, 1-7.

DOI：10.14188/j.1671-8852.2023.0160

• 钙池操纵性钙内流
• 特应性皮炎
• 上皮屏障

目的：探讨钙池操纵性钙内流（SOCE）及其介导的钙信号在特应性皮炎（AD）上皮屏障破坏中的作用。方法：6周龄BALB/c小鼠，采取胶带粘贴及1%DNCB致敏法建立AD模型，分为对照组、AD组、SOCE抑制剂BTP2处理的AD组（AD-BTP2）和外用糖皮质激素处理的AD组（AD-TCS）。采用组织学检查表皮厚度，通过皮水分丢失（TEWL）测定小鼠皮肤屏障功能。体外培养角质形成细胞HaCaT，分为对照组、尘螨(HDM)提取物刺激组和HDM刺激并BTP2干预组(HDM-BTP2)，采用MTT法进行细胞增殖试验，RT-PCR、Western Blot法分别检测SOCE及上皮屏障相关基因的表达。FITC-右旋糖酐通透性实验评估HaCaT细胞屏障功能。结果：AD组小鼠较对照组小鼠的经皮水分丢失和表皮增厚均更为显著（P<0.000 1）；而BTP2处理后AD小鼠的经皮水分丢失（P<0.05）和表皮增厚（P<0.000 1）进一步加重。HDM刺激可以促进HaCaT细胞的增殖，而BTP对细胞增殖没有影响。HDM刺激后HaCaT细胞SOCE相关蛋白Orai1～3,STIM1～2和SARAF的mRNA表达与对照组细胞无差异，但Orai1蛋白表达显著高于对照组（P<0.05）。HDM刺激HaCaT细胞后屏障相关闭合蛋白Occludin和兜甲蛋白Loricrin表达下调;而BTP2处理后可以恢复Occludin和增加E-cadherin的表达。HDM组HaCaT细胞的FITC-右旋糖酐通透性高于对照组细胞，而1μmol/L BTP2可以显著降低HDM诱导的FITC-右旋糖苷通透性改变。结论：在AD动物模型和细胞水平，SOCE抑制剂BTP2对上皮屏障具有相反的效应，提示SOCE在2型炎症中作用的复杂性，相关机制还需要进一步研究。

• 单位
  武汉大学中南医院; 华中科技大学; 武汉市第三医院