miR-30b在低氧环境中调控兔骨髓间充质干细胞成软骨分化

作者：汪仡骁; 吴恒鹏; 万雪; 陈方; 石超; 瓦庆德^*

来源：实用医学杂志, 2021, 37(24): 3113-3118.

• 软骨缺损
• miR-30b
• 骨髓间充质干细胞
• 成软骨分化
• 低氧

目的针对软骨缺损难以自行修复的临床难题,探讨miR-30b调控兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)成软骨分化中的作用及潜在机制,为软骨修复提供新思路。方法密度梯度离心法分离BMSCs;流式细胞术和双向诱导分化实验鉴定细胞;CCK-8和Western blot检测细胞在不同CoCl2浓度下增殖能力和HIF-1α表达变化情况;构建稳定表达miR-30b的细胞株,Western blot检测其靶基因SOX9和Wnt/β-catnein信号通路的表达;在低氧环境中成软骨诱导分化,21 d后Western blot和免疫组化染色检测CollagenⅡ与SOX9的表达。结果流式检测和双向分化实验结果显示细胞高表达CD29和CD34,低表达CD44和CD45,同时具有良好的分化能力。CCK-8结果表明CoCl2溶液诱导的低氧环境可促进BMSCs增殖(P <0.05),且低氧可促进细胞表达HIF-1α。稳定表达miR-30b的细胞在低氧环境中成软骨诱导21 d后,免疫组化和Western blot结果显示CollagenⅡ与SOX9的表达较对照组、空载组及低氧组均明显下调(P <0.01)。结论 miR-30b能降低BMSCs在低氧环境中成软骨分化,为表观遗传学调控干细胞修复软骨缺损提供参考。

• 单位
  遵义医科大学