褪黑素抑制过氧化氢诱导人髓核细胞的损伤

作者：谢文冠; 刘宇涛; 崔文波; 邝铭业^*

来源：中国组织工程研究, 2024, 28(14): 2180-2185.

• 椎间盘退行性病变
• 褪黑素
• 氧化应激
• 凋亡
• PI3K-Akt通路

背景：椎间盘退变是造成腰痛最常见的潜在因素之一，近年来研究表明，褪黑素对缓解椎间盘退变有积极作用，然而褪黑素的潜在作用机制仍有待阐明。目的：探究褪黑素抑制过氧化氢诱导人椎间盘髓核细胞损伤的生物学作用及其潜在的作用机制。方法：体外培养人退行性椎间盘髓核细胞，通过CCK-8法检测细胞增殖情况确定褪黑素及过氧化氢的最佳干预浓度。将过氧化氢处理2 h的细胞作为模型组；经褪黑素干预24 h再用过氧化氢处理2 h的细胞作为褪黑素组；单纯培养基培养的细胞作为对照组。通过活性氧荧光探针(DCFH-DA)检测细胞内活性氧水平，免疫荧光检测BAX和Caspase3表达水平，RT-q PCR检测BAX、BCL-2、Casepase3、PI3K和AKT的m RNA表达水平。结果与结论：(1)CCK-8实验结果表明，过氧化氢最佳干预浓度为400μmol/L，褪黑素最佳干预浓度为5μmol/L；(2)与模型组比较，褪黑素组活性氧水平显著降低；(3)与模型组比较，褪黑素组BAX和Caspase3的平均荧光强度显著降低；(4)与模型组比较，褪黑素组BAX和Caspase3的mRNA表达降低，而Bcl-2 mRNA表达则升高，褪黑素组的PI3K和AKT的m RNA表达也升高；(5)结果表明，褪黑素可能通过PI3K/AKT信号通路保护退行性椎间盘髓核细胞免受过氧化氢诱导的氧化损伤。

• 单位
  广东医科大学; 东莞市第八人民医院