酵母双杂交技术筛选与HCMV-UL146编码产物相互作用蛋白

作者：何蓉; 丛树艳; 齐莹; 马艳萍; 阮强; 蒋树娟

来源：中国现代医学杂志, 2012, (04): 1-5.

• 人类巨细胞病毒
• UL146基因
• 酵母双杂交 human cytomegalovirus
• UL146 gene
• yeast two-hybrid system

目的应用酵母双杂交技术,在人胎脑文库中筛选与人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)UL146基因编码蛋白相互作用蛋白,以探讨HCMV-UL146的生物功能。方法应用酵母双杂交系统,构建pGBKT7-UL146诱饵质粒,转化酵母AH109,与含人胎脑cDNA文库质粒的酵母相互作用,于涂有X-α-gal营养缺陷型培养基上筛选生长。挑选蓝色克隆,提取此酵母克隆的质粒转化大肠杆菌,提取质粒DNA进行测序分析。结果 pGBKT7-UL146构建成功。经严格筛选,共有200余个阳性克隆,分离测序80个克隆,成功筛选出30个与HCMV-UL146特异性相互作用的蛋白。结论 H...

• 单位
  中国医科大学附属盛京医院