HSV1-TK基因重组腺相关病毒载体的构建及表达

作者：丁芝祥; 谭浅; 刘双珍; 刘丹; 李忠庆; 彭建强

来源：中南大学学报(医学版), 2008, (03): 210-215.

• 腺相关病毒
• 胸苷激酶
• 晶状体上皮细胞
• 基因治疗 adeno-associated virus
• thymidine kinase
• lens epithelium
• gene therapy

目的:构建含单纯疱疹病毒I型胸苷激酶(HSV1-TK)基因的重组腺相关病毒载体质粒pSNAV2.0-TK,制备重组腺相关病毒rAAV2/HSV1-TK,并检测HSV1-TK基因在转染晶状体上皮细胞中的整合和表达,为后囊膜混浊的基因治疗奠定基础。方法:用基因重组技术构建含HSV1-TK基因的重组腺相关病毒载体质粒pSNAV2.0-TK,并通过PCR和酶切鉴定;将该质粒转染BHK-21细胞,经G418筛选出携带该质粒的载体细胞株BHK-21/TK,在辅助病毒的参与下包装成重组病毒rAAV2/HSV1-TK;用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法和高效液相色谱(HPLC)法检测重组病毒r...

• 单位
  湖南省人民医院; 中南大学湘雅医院