微量氯化钴法与普通SDS缓冲液裂解法提取缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白效率的比较

作者：刘湘玮; 范书霞; 王聪; 范凡; 马鑫; 申程; 朱洪; 曹全; 王鹏; 邹云增; 葛均波; 孙爱军

来源：中国分子心脏病学杂志, 2013, (05): 686-688.

DOI：10.16563/j.cnki.1671-6272.2013.05.001

• 缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)
• 为共同第一作者氯化钴
• 下肢缺血 Hypoxia-inducible Factor-1α(HIF-1α)
• Cobalt
• Limb Ischemia

目的通过引入微量氯化钴作为稳定剂,建立一种更加简便有效提取HIF-1α蛋白的方法。方法取8只体重在22±2克之间雄性8周龄的C57BL/6小鼠,对其左侧下肢行股动脉段离断术制成下肢缺血模型,并分别以右侧下肢为对照;术后1天采用激光多普勒技术检测下肢血流灌注;术后3天取小鼠双侧股四头肌,分别用微量氯化钴法和普通SDS裂解液裂解法来提取总蛋白;用Western Blot对HIF-1α蛋白水平进行检测。结果 8只小鼠手术均成功;术后1天激光多普勒检测结果显示,小鼠缺血下肢血流灌注/健侧肢血流灌注为15.4±4.8%,下肢缺血手术成功;Western Blot显示,使用普通SDS裂解液法,缺血组HIF...

• 单位
  复旦大学; 复旦大学附属中山医院