摘要
目的 探讨黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AS-Ⅳ)对小鼠小胶质细胞焦亡通路相关蛋白的影响及机制。方法 体外培养小鼠小胶质细胞(BV2),设置Control组(正常对照组),以20 U·mL-1凝血酶激活小胶质细胞作为凝血酶组,20 U·mL-1凝血酶+不同浓度的AS-Ⅳ(1、5和10μmol·L-1)作为实验组。采用免疫印迹及免疫荧光法检测BV2细胞中焦亡相关因子NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶水解1(Caspase-1)、胞膜穿孔蛋白D-N端(GSDMD-N)表达量变化,ELISA法检测细胞培养液中焦亡下游分泌物[白细胞介素(IL)-18、IL-1β]的含量。结果 免疫印迹及免疫荧光结果显示,与Control组比较,凝血酶组BV2细胞内焦亡相关因子(ASC、NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N)蛋白表达量均升高(P均<0.05);与凝血酶组比较,不同浓度AS-Ⅳ实验组BV2细胞内焦亡相关因子(ASC、NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N)表达量均降低(P均<0.05),并且5、10μmol·L-1AS-Ⅳ组较1μmol·L-1AS-Ⅳ组均降低(P均<0.05)。ELISA结果显示,凝血酶组IL-18与IL-1β含量相较于Control组增加(P均<0.05),而不同浓度AS-Ⅳ实验组IL-18与IL-1β含量相较于凝血酶组均减少(P均<0.05),并且5、10μmol·L-1AS-Ⅳ组较1μmol·L-1AS-Ⅳ组均降低(P均<0.05)。结论 AS-Ⅳ可能通过抑制活化的小胶质细胞内焦亡通路相关蛋白的表达来发挥其抗炎作用。
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单位基础医学院; 宁夏医科大学