微小RNA-3677靶向调控B细胞易位基因1表达及对肝细胞癌细胞侵袭迁移的影响

作者：魏世平; 尹晓燕^*; 田新利; 李宏勇; 李娜

来源：临床肿瘤学杂志, 2019, 24(08): 690-694.

• 肝细胞癌
• 微小RNA-3677
• 侵袭迁移
• B细胞易位基因1

目的探讨微小RNA-3677(miR-3677)对B细胞易位基因1(BTG1)的靶向调控作用及肝细胞癌(HCC)细胞HepG2侵袭和迁移的影响。方法采用脂质体Lipofectamine 2000向HepG2细胞转染miR-3677抑制剂(Inhibitor组)和阴性对照序列(NC组)并以未行转染的细胞为对照组,采用实时定量PCR(QPCR)检测miR-3677水平,划痕实验和Transwell实验分别检测划痕宽度和穿膜细胞数目,双荧光素酶报告基因实验验证miR-3677与BTG1的靶向关系,QPCR检测BTG1、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和信号转导和转录激活因子3(STAT3)的mRNA水平,Western blotting检测BTG1、MMP-9、STAT3和磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT3)的蛋白水平。结果 QPCR结果显示Inhibitor组的miR-3677水平为0.241±0.059,低于对照组的1.012±0.123和NC组的1.147±0.168(P<0.05);Inhibitor组的穿膜细胞数和划痕相对宽度分别为(96.5±9.2)个和(62.15±3.29)%,均优于对照组的(174.5±12.9)个和(37.45±2.16)%及NC组的(181.6±16.4)个和(39.47±2.82)%,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-3677模拟物抑制了BTG1野生型3′端非翻译区的荧光素酶活性,而对突变型的无影响。与其余两组相比,Inhibitor组的BTG1表达水平升高,而MMP9和p-STAT3的水平降低(P<0.05)。结论下调miR-3677水平可抑制HCC细胞的迁移侵袭,该miRNA发挥癌基因的作用,可能与通过靶向BTG1以激活JAK/STAT3信号传导有关,为HCC提供一个新的潜在治疗靶点。

• 单位
  邢台医学高等专科学校